建立满山红叶HPLC指纹图谱并测定杜鹃素含量(二)
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2.4 方法学考察
2.4.1 线性关系考察
取“2.1”项下的建立鹃素对照品溶液,加适量甲醇制成每1 mL含100、满山50、红叶含量25、指纹12.5、图谱6.25、并测3.125 μg的定杜对照品溶液,照“2.3.1”项的建立鹃素实验条件,用高效液相色谱仪检测,满山峰面积为X轴,红叶含量以含量为Y轴,指纹得到杜鹃素的图谱回归方程为Y=2E+0.9X-492 161,r=0.999 5,并测线性范围3.125~100 μg,定杜表明线性良好。建立鹃素
2.4.2 精密度试验
选用适量的“2.2”项供试品溶液,根据“2.3.1”项的实验条件,连续进样6次,10个共有峰相对保留时间RSD<1%,相对峰面积的RSD<3%,供实验用仪器具有良好的精密度,结果见表2,表3。
2.4.3 稳定性试验
选用适量的“2.2”项供试品溶液,根据“2.3.1”项确定的色谱条件,在0、2、5、8、14、18、24 h依次测定,10个共有峰的相对保留时间RSD<2%,相对峰面积RSD<3%,证明该溶液24 h内化学成分稳定,结果见表4,表5。
2.4.4 重复性试验
根据“2.2”项确定的供试品制作方式制作6份,分别根据“2.3.1”项确定的色谱条件检测,分析说明10个共有峰的相对保留时间RSD<1%,相对峰面积的RSD<3%,具备良好的重复性,结果见表6,表7。
2.5 满山红叶中杜鹃素含量测定
用“2.2”下方法,制备15批满山红叶的供试品溶液;取“2.1”下对照品适量,用适量甲醇稀释成每1 mL含0.05 mg的对照品溶液,按照“2.3.1”项的色谱条件,分别用高效液相色谱仪检测,结果见表8。
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