热加工肉制品中多环芳烃的检测技术研究进展 （二）

2.1.5固相微萃取技术

固相微萃取技术（SPME）属于非挥发性溶剂型选择性萃取的热加方法，其根据相似相容原理，工肉利用具有不同涂层的制品中多萃取头，对样品中的环芳目标分析物进行萃取，能够实现集提取、检测技术进展富集、研究净化、热加进样为一体的工肉全过程。MA等将共价有机骨架材料TpBD固定在不锈钢线上为固相微萃取纤维用于SPME，制品中多并用GC-MS法检测烤肉中16种PAHs，环芳结果显示检测限为0.02~1.66ng/L，检测技术进展定量限为0.07~5.52ng/L，研究回收率为85.1%~102.8%。热加康迪等采用新型活性炭纤维（ACF）作为固相微萃取（SPME）的工肉萃取纤维与气相色谱-质谱（GC/MS）联用检测烤肉中的PAHs。结果表明，制品中多16种PAHs的线性范围为1~1000μg/L，检测限在0.1~50μg/kg之间。SPME技术效率高且无需使用有机溶剂，同时可与仪器直接联用，因此得到广泛的应用。但是目前大多数萃取涂层材料价格昂贵，且选择性较差，开发高选择性、高稳定性的涂层材料对SPME技术发展尤为关键。

2.1.6凝胶渗透色谱法

凝胶渗透色谱法（GPC）主要是通过化学性质相似但分子体积不同而进行分离，即大分子物质先流出，小分子后流出，可去除大分子物质。且对于分子体积相差较大的物质分离效果较好。LUCIA等通过ASE提取，GPC纯化，GC-MS检测技术对蓝贻贝、鲑鱼鱼片、鱼油和鱼饲料中24种PAHs进行定性与定量分析，结果显示，小分子苊（Ace）、芴（Fl）、芘（Py）和苯并(a)蒽（BaA）的定量受到了限制，苯并(a)芘（BaP）的检出限和定量限分别为1.7pg/g和0.44pg/g。该方法可用于海洋基质中石油类化合物的定性鉴别。于徊萍等利用GPC净化，GC-MS分析食用油脂中16中PAHs，回收率在80.6%~106.7%之间，检测限为0.11~1.1μg/kg。

2.1.7QuEChERS

QuEChERS是快速（Quick）、简便（Easy）、廉价（Cheap）、有效（Effective）、可靠（Rugged）及安全（Safe）的样品前处理技术的缩写，样品经过溶剂提取后，通过加入吸附剂与样品中干扰物结合，从而达到净化目的。ODUNTAN等采用优化后的QuEChERS前处理方法，使用HPLC-荧光定量分析了鲤鱼肌肉中的5种低分子量PAHs，萘(Nap)、苊(Ace)、菲(Phe)、芴(Flu)和芘(Pyr)。与索氏提取法相比较，提取PAHs的浓度相当，鲫鱼中PAHs的含量，芴的最小浓度为0.8μg/kg,苊的最大浓度为739μg/kg。DUEDAHL等建立并验证了QuEChERS法作为一种新的快速简便的PAHs筛选方法，并用于苯并(a)蒽（BaA）、䓛（Chr）、苯并(b)荧蒽（BbF）和苯并(a)芘（BaP）4种PAHs的定量分析（GC-QTOF-MS），4种PAHs化合物的定量限在0.14~0.24μg/kg（鱼类）和0.12~0.24μg/kg（生大麦）之间。总回收率为88%~117%，重复性和内部重现性为2.6%~16%。该方法可作为评价熏鱼的快速筛选方法。QuEChERS因其高效便捷、绿色安全，在批量样品处理和检测中具有很大优势而得到广泛的使用，且随着科学技术的发展，自动化水平的提高，QuEChERS在肉制品等食品中PAHs的前处理上具有广阔的应用前景。

不同的前处理方法，优缺点不一，同时对PAHs提取效率和分析检测结果都可能造成不同程度的影响，不同前处理方法的优缺点比较见表2。针对不同样品特性，选择最适合的样品前处理方法，可以提高提取效率，从而保证分析结果的准确性和可靠性。

2.2 检测方法

PAHs的检测分析方法较多，主要涉及高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用技术、毛细管电泳法、酶联免疫法、表面增强拉曼光谱技术等。

2.2.1高效液相色谱法

高效液相色谱法（HPLC）是我国食品安全部门关于对食品中PAHs的测定规定GB5009.265—2016当中第一种方法。王春蕾等通过在线固相萃取/高效液相色谱-紫外/荧光(Online-SPE/HPLC-UV/FLD)检测方法，对熏烤鱼和熏烤肉制品中15种PAHs进行检测，结果表明，标曲线性良好，熏烤鱼的回收率为67.4%~107.2%，熏烤肉制品的回收率为71.8%~110.5%。KHOSROWSHAHI等利用一种由向日葵茎和石墨化氮化碳纳米片组成的绿色生物复合材料为固相萃取吸附剂，采用高效液相色谱结合紫外检测，最佳条件下5种PAHs的检测限和定量限分别可达0.4~32ng/g和1.2~95ng/g。另外，该方法也可应用于烤肉等PAHs的测定。HPLC检测存在分析时间长、基线易漂移等缺陷，今后发展关键在于提高其检测效率和结果准确性。

2.2.2气相色谱-质谱法

气相色谱-质谱法（GC-MS）是国家标准第二法，具有高分辨性和高灵敏度的特点，广泛应用于PAHs检测分析中。刘笑笑等比较中性氧化铝柱、HLB小柱、分子印迹技术、GPC凝胶色谱净化技术、QuEChERS法5种不同萃取净化法结合气相色谱-串联质谱法检测烤肉中14种PAHs含量的效果，结果表明，分子印迹柱稳定性更好，成本更低，更适用于烤肉中14种PAHs残留的检测，分子印迹柱和GPC方法在烤肉制品中平均回收率为80%~100%。周华等建立了一种快速、高效、准确的SPE联合GC-MS，测定烟熏、烘烤食品中16种PAHs，检出限0.03~0.10μg/kg，定量限0.10~0.30μg/kg。WICKRAMA等采用高分辨率GC-MS测定了三种金枪鱼组织中卤代多环芳烃的含量，这是第一次在生物样品中发现大量的卤代多环芳烃，HPAHs可能对食用金枪鱼的人的健康产生不利影响。GC-MS是目前分析复杂组分最有效的检测方法之一。是目前最常用的检测易挥发和半挥发性有机物的方法，可同时进行定性和定量分析。

2.2.3毛细管电泳法

毛细管电泳法（CE）是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离分析技术，主要依据样品中各组分之间淌度和分配行为的差异来实现分离。CE是色谱和电泳相结合的分离分析技术。潘红等建立了三种CE分析烤肉中PAHs，实验表明，胶束电动色谱-场放大样品堆积法（MEKC-FASS）检出限较低，能够应用于烤肉中多种痕量PAHs的快速富集和检测。FEREY等优化了环糊精修饰的毛细管区带电泳分离方法，首次在CE中实现所有19种PAHs的完全分离，分析时间小于18min；优化后的CE可用于植物油等复杂基质的样品中PAHs的检测分析。

2.2.4酶联免疫分析法

酶联免疫分析法（ELISA）主要是利用样品中抗原与抗体的可逆性结合这一特性，通过调控反应过程实现检测目的。KNOPP等研究了ELISA直接测定样品PAHs的结果可行性，并在精确度和结果可靠性方面与HPLC进行了对比。结果表明，ELISA的选择性和灵敏度要显著优于HPLC，极大程度缩短了测定时间。BARCELO等采用ELISA测定水中的PAHs，回收率为70%~95%。ELISA基于的原理是抗体的特异性，一般只适用于单一PAHs的检测，开发具有相对普适性，提高检测通量是ELISA技术发展的关键。

2.2.5拉曼光谱技术

随着纳米技术和表征技术的发展，以拉曼光谱为基础发展起来的表面增强拉曼光谱（SERS）以超高的灵敏度在分析检测领域引起人们广泛的关注。肖旺等利用硫醇修饰的银纳米点阵列作为SERS活性基底，SERS结合分子印迹技术快速检测食用油中的苯并(a)芘，检测限达5.0ng/mL，回收率在93%~100%之间。王炬勇等以银纳米粒子为SERS基底，结合液液萃取（LLE）与流动注射分析（FIA）技术，发展了LLE-SERS与FIA-SERS两种检测方法，最终研发了一套船载式PAHs检测仪，为PAHs的现场检测提供了新的技术。

食品种类多样，组成成分以及加工工艺的不同都可能会增加PAHs的检测难度。因此，在实际检测过程中应当根据检测需要，结合检测方法的技术特点及待检样本的特性进行选择。不同检测方法的优缺点比较情况见表3。

3总结

随着科技的发展，多学科、多领域的新技术逐渐应用于PAHs检测分析，如何在国际上建立并统一高效、快速、可靠的PAHs在线分析检测技术是目前亟需研究和完成的热点。PAHs检测技术发展方向主要涉及简化样品前处理以及改进仪器，提高检测效率和准确度。近年来，样品前处理技术发展迅速，其核心在于萃取材料的制备与选择，新型的吸附材料如磁纳米粒子、分子印迹聚合物、金属有机框架化合物、碳纳米管等受到极大关注。选择性高、稳定性好的吸附材料对前处理具有决定性作用。

中国是肉类生产和消费大国，人们对安全健康食品的追求逐年上升，食品安全越来越受到广泛关注。联合多种先进新技术，构建在线富集、净化、检测等一体化分析技术，实现PAHs检测分析的高灵敏度、高通量、便携化、智能化是未来技术发展的关键。

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